Путь замороженного эмбриона от витрификации до отогрева

Иногда эмбрион замораживают в одной клинике, а размораживают для переноса в другой. С ним последовательно работают две лаборатории и перевозчик. Записи каждого участника помогают восстановить ход событий. Например, при приёмке число носителей и маркировка могут совпасть, а при отогреве эмбрион не удаётся обнаружить на кончике носителя. С этого наблюдения начинается расследование.

Крионосители и транспортные сосуды

Диаметр бластоцисты на пятые или шестые сутки составляет примерно 100–200 микрометров. Витрификация сочетает криопротекторы и быстрое охлаждение, чтобы свести к минимуму образование кристаллов льда. Эмбрион помещают на специальный носитель и затем хранят при криогенной температуре. В открытой системе микрокапля с эмбрионом контактирует с жидким азотом напрямую, после чего на носитель надевают защитный чехол. В закрытой системе образец изолирован от жидкого азота. Способ герметизации и отогрева зависит от модели.[1,8]

Для перевозки используют сухие криогенные сосуды. Абсорбент внутри удерживает жидкий азот, а пары азота поддерживают низкую температуру. Для одной из моделей, указанных в исходной статье, заявлено поддержание температуры ниже −150°C примерно десять суток при заданных условиях. Для конкретной отправки имеют значение модель, подготовка сосуда и температурный журнал.[5,8]

В ретроспективном исследовании 2023 года сравнили 621 бластоцисту, отогретую в одной итальянской лаборатории. Из них 450 заморозили на месте, а 171 привезли из испанских клиник той же сети.[2]

Статистически значимых различий по этим показателям не обнаружили. Для клинической беременности значение P составило 0,06. В исследовании не оценивали живорождение, а перевозку изучали в пределах одной сети клиник. В отдельном эксперименте 96 часов в парах азота в сухом сосуде не ухудшили изученные показатели жизнеспособности мышиных эмбрионов. Доля образцов, обнаруженных после отогрева, различалась между носителями. Эти данные нельзя переносить на человеческие эмбрионы.[2,3]

Пять этапов от замораживания до отогрева

Британский регулятор HFEA описывал случаи, когда перемещение без проверки вторым сотрудником или несвоевременное обновление записей о хранении приводили к тому, что образец временно считали пропавшим. При расхождениях в маркировке, количестве или месте хранения лаборатории могут сверить, что отправили, приняли, отогрели и оставили на хранении.[4]

Температурный журнал описывает условия охлаждения. Для выяснения причин ослабления крепления или отсоединения носителя изучают сам носитель и данные об обращении с ним, досмотрах и ударах. При отогреве лаборатория вскрывает носитель и без промедления обрабатывает образец по протоколу для соответствующей модели.[1,8]

Что позволяет установить приёмка

При получении проверяют упаковку, количество и маркировку носителей, а также температурные данные. Эмбрион внутри носителя обычно становится виден только при отогреве. Штатная приёмка и обнаруженное позже отклонение могут быть одинаково достоверными. Выяснить время происшествия помогают вещественные данные и записи по обе стороны передачи.

Место обнаружения сужает круг возможных причин. Следы повреждения, фотографии, записи о хранении и перевозке, а также наблюдения при отогреве оценивают в совокупности.

Если эмбрион не обнаружен при отогреве

Лаборатория проверяет идентификацию, место хранения и материальные следы. Пока причина не выяснена, попросите сохранить условия хранения остальных эмбрионов. Дополнительный эмбрион не следует отогревать только для проверки, повторится ли проблема. Расследованием и сохранением материалов занимаются квалифицированные сотрудники лаборатории.[1]

1. Сохранить носитель, чехол, раствор для отогрева и другие материалы, где может быть образец. Зафиксировать их состояние.
2. Поручить эмбриологам проверить материалы, место хранения и записи по другим носителям. Если образец обнаружен, его состояние оценивает лаборатория.
3. Сверить каждый носитель и количество эмбрионов при выдаче, перевозке, получении и отогреве с остатком на хранении.
4. Запросить записи о замораживании, хранении, перевозке, приёмке и отогреве, включая исходный температурный журнал и подписи при передаче.
5. Запросить у участников письменные отчёты. При необходимости привлечь независимого эмбриолога, затем обсудить дальнейшие действия и страховое покрытие по договорам.

Одна лаборатория или перевозка между клиниками

Замораживание, хранение и отогрев в одной лаборатории сокращают число перемещений и передач. При работе двух лабораторий заранее проверяют совместимость носителя с протоколом отогрева, порядок хранения документов и расследования отклонений. Отдельно согласуют сроки доставки и подготовки эндометрия.

Контроль хранения важен в обеих ситуациях. В исходной статье приведены случаи 2018 года в Кливленде и Сан-Франциско, связанные со сбоями сосудов хранения.[6,7] Американское общество репродуктивной медицины (ASRM) рекомендует электронный контроль, предпочтительно датчики уровня жидкого азота, проверку системы не реже раза в квартал и письменный аварийный план.[1]

Что согласовать до отправки

• Носитель и протокол отогрева. Отправитель указывает модель, партию, количество носителей и эмбрионов. Принимающая лаборатория подтверждает, что может работать с соответствующим протоколом.
• Замораживание и выдача. Сверяют маркировку, фиксацию и контроль вторым сотрудником. При наличии фотографий согласуют их хранение и предоставление.
• Документы о перевозке. Указывают номер сосуда, температурный журнал, подписи при передаче, порядок действий при задержке, досмотре или отклонении.
• Приёмка и отогрев. Определяют объём проверок, место хранения, исполнителя и проверяющего, а также порядок хранения отчётов.
• Страхование и расследование. В соглашении фиксируют покрытие, обязанности, сроки передачи документов и порядок независимого рассмотрения.

Между отправкой и переносом стоит предусмотреть время на приёмку. После помещения эмбрионов на хранение и сверки идентификаторов, количества и температуры клиническая команда может согласовать начало подготовки эндометрия. Ориентиром служат письменные планы лабораторий и лечащего врача.

Медицинская информация и иллюстрации

Статья знакомит с этапами перевозки и документацией. Решения об отогреве, расследовании и переносе принимают лаборатории и лечащий врач. Использованы концептуальные иллюстрации.